E. D. Mytsa, L.Yu. Kokaeva, S.N. Elansky
Oomycete Fitophthora infestánok (Mont) de Bary késői gyulladást okoz, a burgonya és a paradicsom veszélyes betegségét. Az elsődleges oltás egyik fő forrása P. infestans vastag falú nyugvó reproduktív szerkezetek - oosporák.
A genetikailag különböző szülői törzsek keresztezése eredményeként képződött hibrid oosporák hozzájárulnak a populáció genotípusos sokféleségének növekedéséhez, amelynek eredményeként felgyorsul a törzsek új fajtákhoz és alkalmazott fungicidekhez való alkalmazkodásának folyamata.
Oospóraképzés P. infestans a világ számos országában: Oroszország (Smirnov et al., 1999), Norvégia (Hermansen et al., 2002), Svédország (Strömberg et al., 2001), Hollandia (Kessel et al., 2002) és mások régiók. Az oosporák életképes állapotban több mint 2 évig képesek fennmaradni a talajban (Bødker et al., 2006), és áttelelés után növényi fertőzést okozhatnak (Ulanova et al., 2010; Lehtinen et al., 2002).
Korábban kimutatták, hogy a burgonyabokor különböző rétegeiből származó növények levelei különböznek a késői esés ellenállóképességétől; az alsó levelektől a felsőig nő. Ez a tendencia nem függ a levél életkorától, a növény korától vagy a burgonyafajtától (Vesper és mtsai., 2003). Ugyanakkor nem találtunk adatokat az irodalomban a burgonyabokor különböző rétegeinek leveleiben az oospóraképződés intenzitásának különbségeiről. Ha azonban léteznek ilyen különbségek, akkor azokat figyelembe kell venni, amikor levélmintákat vesznek az oospóraképzés elemzéséhez, és amikor más szerzők által kapott eredményeket értelmezik. E munka célja az volt, hogy megvizsgáljuk az oosporák képződését a burgonyanövény különböző rétegeinek levált leveleiben, ugyanolyan körülmények között, párás kamrákban.
Anyagok és metódusok
5 izolátumot használtunk P. infestans Moszkva, Rjazan és Leningrád régióból hozott érintett mintákból izolált különféle párzási típusok. Közülük 3 pár különböző típusú párzási törzset választottunk ki, amelyek agar zabpehely közegben tesztelve bőséges oosporákat adtak.
A teszteléshez vírusmentes burgonyanövényeket használtunk a következő fajtákból, amelyeket üvegházban (tőzeg szubsztrátumban) termesztettek: korai Sandrin, Zorachka, Uladar, Osiris, közepesen korai Ilyinsky, évszak közepén Yanka.
Az elemzéshez a burgonyanövény különböző szintjeiről származó egyszerű leveleket választottunk ki. Három levelet választottunk az alsó szintből (4 alsó összetett levél), hármat felülről (3-4 összetett levél a tetején), és három levelet a bokor közepétől. Az egyszerű leveleket lemértük, koordináta papíron lefényképeztük (a térfogat és a terület kiszámításához), majd fejjel lefelé helyeztük a steril víz felületére, 25 ml-t öntöttünk Petri-csészékbe. Ezután mindegyik levelet megfertőztük az A1 és A2 párzási típusú zoosporangia izolátumok kevert szuszpenziójának egy cseppjével. Az egyes szintekről gyűjtött három levélhez három különböző izolátumpár oltóanyagát használtuk. Az egyik levelet egy pár izolátum oltóanyag-keverékével fertőztük meg.
A zoosporangia szuszpenziójának előállításához különböző párzási típusú izolátumokat növesztettünk agar zab táptalajon 7 napig, majd steril desztillált vízzel mossuk le a zoosporangiumokat. Az oltóanyag koncentrációja 5-7 zoospora volt a mikroszkóp látómezejében 80-szoros nagyítással. Mindegyik levelet megfertőztük egy csepp A1 és A2 párzási típusú zoosporangia izolátum kevert szuszpenziójával.
Minden kísérletben 3 burgonyalevelet használtunk változatonként. 20 napig 18 ° C-on végzett inkubálás után az egyes leveleket mozsárban 2 ml desztillált vízzel homogenizáltuk. A kapott szuszpenzióból 3 mintát vettünk, amelyekből mikroszkópiás készítményeket készítettünk.
Mindegyik változatban 180 látómezőt vizsgáltunk, majd 1 mm-re számoltuk át az oosporák számát2 lapfelület. Az egyes változatok számlálási eredményeit átlagoltuk.
A megbízhatósági intervallum (μ) kiszámításához 0,05-ös szignifikancia-szintre a következő képletet használtuk
ahol s a szórás, n a mérések száma, t a t-tesztállandó 0,05 szignifikanciaszint esetén. Minden számítást Excelben (Microsoft Office csomag) hajtottunk végre.
Eredmények és vita
A burgonyabokor különböző rétegeiből összegyűjtött és ugyanolyan körülmények között, nedves kamrákba helyezett levelek beoltása különbségeket tárt fel az oospóraképződés intenzitásában. Valamennyi vizsgált fajtában a bokor alsó és középső szintjéből összegyűjtött levelek beoltása során alakult ki az oosporák maximális száma. Nem találtunk szignifikáns különbséget az oosporák kialakulásában az alsó és a középső levelekben.
A felső réteg leveleiben az oosporák minimális száma képződött (1. ábra).
Az alsó és a középső réteg leveleiben az oosporák maximális száma a Sandrin, Ilyinsky, Zorachka, Uladar és Osiris fajtákban alakult ki. Valamivel kevésbé intenzíven képződtek a Yanka fajta leveleiben. A felső réteg leveleiben az oosporák maximális számát az Uladar fajta leveleiben figyelték meg, majd Zorachka, Osiris, Yanka, Ilyinsky, Sandrin csökkenő sorrendben következtek, azonban nem minden különbség volt statisztikailag szignifikáns.
Ábra: 1. Oosporák képződése a burgonyabokor különböző rétegeinek leveleiben. Az alsók a bokor három alsó szintjének levelei, a felsõk 3-4 összetett levél a növény tetejétõl, a középsõk a bokor közepébõl.
A hibasávok a megbízhatósági intervallumot mutatják 0,05-ös szignifikanciaszint esetén.
A terepen a mikroklimatikus viszonyok szintén hozzájárulnak az oosporák kialakulásához a bokor alsó és középső leveleiben: nagyobb a páratartalom, csökken a napsugárzás és a napi hőmérséklet-ingadozások (Harrison, 1992). A felső permetezés kevesebb peszticidet eredményez a bokor alján és közepén. Az oosporák kialakulásának csökkentése érdekében olyan technológiákat kell alkalmazni, amelyek lehetővé teszik a fungicidek sikeres átadását a bokor alsó és középső részébe. Jó eredményeket lehet elérni turbulens légszórók és szisztémás fungicidek alkalmazásával, amelyek átterjedhetnek a bokor kezeletlen részeire.
Ezt a munkát az Orosz Tudományos Alapítvány támogatta (projekt projektje: 14-50-00029).
A cikk a "Potato Protection" folyóiratban jelent meg (2. 2015. sz.)